寄生虫怎么保存
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寄生虫怎么保存,在寄生虫学实验研究中,过去通常应用接种实验动物和体外人工培养等方法进行寄生虫的保种,但是有时候会不小心破坏寄生虫的保存。以下分享寄生虫怎么保存?
蠕虫成虫的固定与保存
1、线虫
生理盐水洗净虫体粘附的污物,然后用加热至70~80℃的70%酒精或巴氏液(甲醛3份、生理盐水97份)固定,冷却后移至新的70%酒精或巴氏液中保存。小型线虫(旋毛虫、蛲虫、钩虫等)宜用甘油酒精(70%酒精95ml、甘油5ml)加热固定,保存于80%酒精中。也可用冰醋酸固定约半小时后移入70%酒精或甘油酒精中保存。
2、吸虫
小型吸虫可置于小瓶中,加生理盐水,用力摇荡数分钟,倒去生理盐水,注入固定液。较大的吸虫应先放在薄荷脑酒精液(薄荷脑24g、95%酒精10ml)中,使虫体肌肉松驰,用载玻片压平后固定
或将洗净后的吸虫放在两片载玻片间用细线紧扎压平后固定。一般用10%福[尔]马林固定,24h后移至5%福[尔]马林中保存,也可用70%酒精固定0、5~3h,视虫体大小而定,再移至新的70%酒精中保存。
3、绦虫
大型绦虫如猪、牛带绦虫,可将虫体浸入自来水中8~12h,使虫体在水中充分伸展、松驰,然后移至3%福[尔]马林溶液中固定,24~28h后转置5%福[尔]马林溶液中保存。小型绦虫可先在生理盐水中清洗数次,然后于3%福[尔]马林溶液中固定3~5h,再移入5%福[尔]马林溶液中保存。
如需染色制片时,将虫体从上述3%福[尔]马林溶液中取出后置载玻片上,用另一载玻片轻压,沿载玻片边缘滴加5%福[尔]马林溶液固定数小时,最后移至5%福[尔]马林溶液中保存。
三、昆虫的保存
1、干标本的保存
系保存有翅昆虫。可用特制的昆虫针针插虫体。大型昆虫如蝇、虻等用1~3号昆虫针,从虫体背面、中胸右侧直插。注意保存左侧完整,以便鉴定。
小型昆虫如:蚊、蛉、蚋、蠓等,取00号短针插入软木片的一端,然后用这个00号短针自胸部腹面、两中足基部之间插入,不可刺透胸背,再用另一长针从软木片的另一端插入,将针插好的昆虫插入昆虫盒的软木板上。盒内放入纸包的樟脑粉防蛀。
2、湿标本的保存
用于保存有翅昆虫的卵和幼虫期及其无翅昆虫和蜱螨类的发育各期。活标本先经加温70%酒(60~70℃)固定,1d后保存于甘油酒精中,也可用5%或10%福[尔]马林和巴氏液固定保存。
四、原虫的低温保存
用液氮保存原虫,具有保持原虫的生物学特性且保存时间较长(1~2年)的优点。现仅介绍疟原虫和阴道毛滴虫的低温保存方法。
1、冻存方法
(1)鼠疟原虫从感染疟原虫第3~4d的小鼠尾部(或心脏)取血,在1mm3阳性鼠血加0、1mm3的3、8%枸椽酸钠抗凝之后,按0、5~1、0ml分装入无菌安瓿(或塑料管)内,封口(或盖严)后,放入标明日期的纱布袋中,装于液氮罐的提筒内,立即直接置液氮中保存。
(2)阴道毛滴虫用无菌拭子取阴道分泌物,放入培养基中培养48h,转种于RPMI-1640培养基中2d。取含虫培养液经1000rpm离心10min,在沉淀中加入10%DMSO2ml,如上法分装及冻存。
2、复苏与观察需要时从液氮罐中取出保种小管,迅速投入37~40℃温水中,经4~5min即溶化。将阴道毛滴虫接种于肝浸汤培养基上,37℃培养3~4d后,涂片镜检活动的滋养体,或染色观察。冻存的鼠疟原虫,经腹腔接种小鼠,每只0、2ml,接种后4~5天取鼠尾血,涂片,姬氏液染色镜检。
寄生虫标本的保存,除制成玻片标本永久保存外,还可用以下各种保存方法。
一、原虫包囊和虫卵的保存
汞碘醛液10ml与粪便1g混匀后密封在瓶内,可保存其中的原虫包囊及虫卵数月之久,也可在经浓集法处理的粪便沉渣中加等量或1倍量的10%甲醛液(加热至70℃),摇匀,用石蜡封固瓶口。
二、蠕虫成虫的保存
1、线虫 生理盐水洗净后用加热至70~80℃的70%酒精或巴氏液(甲醛3份,生理盐水97份固定,冷却后移至新的70%酒精或巴氏液中保存。小型线虫(如旋毛虫、蛲虫、钩虫等)宜用甘油酒精(70%酒精95ml,甘油5ml)加热固定,保存于80%酒精中;也可用冰醋酸固定约半小时后移入70%酒精或甘油酒精中保存。
2、吸虫 小型吸虫可置于小瓶中,加生理盐水,用力摇荡数分钟,倒去生理盐水,注入固定液。较大的吸虫应先放在薄荷脑酒精液(薄荷脑24g,95%酒精10ml)中,使虫体肌肉松弛,用载玻片压平后固定,或将洗净后的吸虫放在两片载玻片间用细线紧扎压平后固定。
固定一般用10%甲醛,24小时后移至5%甲醛中保存;或用70%酒精固定0、5~3小时,视虫体大小而定,再移至新的70%酒精中保存。
3、绦虫 大型绦虫(如猪、牛带绦虫)经清水洗涤数次后,在生理盐水(4℃)中经过数小时或过夜,虫体可完全伸展,此时以3%福[尔]马林固定,24小时后移至5%福[尔]马林中保存,必要时也可先用大玻璃板压平后固定。小型绦虫洗涤后可在3%福[尔]马林中固定3~5小时,用载玻片轻压,沿盖玻片边缘加5%甲醛固定数小时,最后保存在5%福[尔]马林溶液中。
新研究显示了如何保存寄生虫以及为什么它很重要
与受到我们关注(以及我们的保护资金)的许多具有超凡魅力的哺乳动物,鱼类和鸟类不同,寄生虫被认为是可以消灭的东西-当然不是要保护的东西。
但是,只有4%的`已知寄生虫可以感染人类,而且大多数实际上起到了至关重要的生态作用,例如调节野生生物,否则野生生物可能会扩大种群规模并成为害虫。尽管如此,只有大约10%的寄生虫被发现,因此,大多数寄生虫被排除在保护活动和研究之外。
一个国际科学家团体希望改变这种状况。包括华盛顿大学的切尔西伍德在内的大约十二位主要的寄生虫生态学家于8月1日在《生物保护》杂志上发表了一篇论文,其中提出了一项雄心勃勃的全球寄生虫保护计划。
华盛顿大学水生与渔业科学学院的助理教授伍德说:“寄生虫是一个极其多样的物种,但作为一个社会,我们并不认为这种生物多样性具有价值。”“本文的重点是强调,我们正在失去寄生虫及其所发挥的功能,甚至没有意识到它。”
作者提出了下一个十年的12个目标,这些目标可以通过研究,倡导和管理相结合来促进寄生虫生物多样性的保护。
北卡罗莱纳州立大学论文与项目联合负责人,副教授斯凯拉尔·霍普金斯说:“尽管我们对大多数寄生虫物种了解甚少,但我们仍然可以采取行动来保护寄生虫的生物多样性。”
也许最雄心勃勃的目标是在未来十年内描述世界上一半的寄生虫。研究人员说,提供分类学描述可以命名物种,这是保护过程的重要组成部分。
另一个项目的共同负责人,乔治敦大学的助理教授科林·卡尔森说:“如果物种没有名字,我们就无法保存它们。”“几十年来,我们已经接受了大多数动物和植物的信息,但是科学家只发现了地球上所有寄生虫的一小部分。那些是最后的前沿:深海,深空和生存的世界在地球上每个物种内部。”
重要的是,研究人员强调,在人类的保护计划中没有感染人类或家养动物的寄生虫。他们说,应该控制这些寄生虫,以维护人类和动物的健康。
该论文是致力于寄生虫保存的整个特别版的一部分。伍德是该集合中一项研究的主要作者,该研究发现寄生虫对环境变化的反应可能很复杂,而且一个不断变化的世界可能会同时看到某些寄生虫的暴发和其他寄生虫物种的全部丧失。
伍德说:“我们需要认识到,寄生虫类群之间的反应将是多种多样的,而不是想当然地认为每个寄生虫都在逐渐消灭或即将造成重大疫情。”
寄生虫通常需要两个或多个宿主物种才能完成其生命周期。例如,某些寄生虫首先感染鱼类或两栖动物,但最终必须传播给鸟类才能繁殖和繁殖。伍德解释说,他们通过巧妙的方式确保做到这一点,通常是通过操纵第一批宿主的行为甚至解剖,使这些鱼或两栖动物更容易被鸟类食用。这样,寄生虫便会传播给鸟类-它的最终目的地。
鉴于这种动态,伍德及其同事想知道,如果他们所生活的生态系统发生变化,那么大量的寄生虫将会发生什么。他们在加利福尼亚州中部东湾地区的16个池塘中设计了一个实验。在一半的池塘中,他们安装了诸如鸟舍,漂浮的栖息处和野鸭诱饵之类的结构,旨在吸引更多的鸟类,从而暂时改变了自然生态系统并增强了这些池塘中的生物多样性。
几年后,研究人员分析了16个池塘中每个池塘的寄生生物多样性。他们发现了一个混合袋:有些寄生虫物种通过减少数量来应对鸟类生物多样性的提高。但是,随着鸟类生物多样性的增加,其他寄生虫的数量实际上也在增加。作者得出结论,随着生物多样性的变化-由于气候变化,发展压力或其他原因-我们可以期望看到寄生虫的不同反应,即使是那些生活在同一生态系统中的寄生虫。
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